蛋白質分析儀作為生物化學、制藥研發和臨床診斷中關鍵的工具,其檢測結果的準確性直接關系到實驗結論的可靠性。然而,在實際使用過程中,多種因素可能導致數據偏差。識別常見誤差來源并實施科學的校準優化策略,是保障分析質量的關鍵。
一、常見誤差來源
樣品處理不當
蛋白質易受溫度、pH值和機械剪切影響而變性或降解。若樣品未在冰上操作、反復凍融或離心不充分,會導致濃度測定失真。
試劑批次差異
不同批次的染色試劑(如Bradford、BCA試劑)可能存在靈敏度波動,尤其在低濃度區間影響顯著。
儀器光學系統漂移
光源老化、比色皿污染或光路偏移會導致吸光度讀數偏差。長期未清潔的樣品倉還可能引入雜散光干擾。
標準曲線擬合誤差
標準品配制不準、稀釋誤差或非線性區間強行線性擬合,都會造成定量結果系統性偏高或偏低。
環境干擾
實驗室溫濕度劇烈變化、電磁干擾或振動可能影響精密傳感器穩定性,尤其對微流控或毛細管電泳類蛋白質分析儀影響更大。

二、校準與優化策略
定期執行基線校準:每日開機后運行空白對照,每周使用標準蛋白(如牛血清白蛋白BSA)進行全量程校準。
建立內部質控體系:每次檢測插入已知濃度的質控樣本,監控批內與批間重復性(CV應<5%)。
規范操作流程(SOP):統一樣品稀釋方法、反應時間與溫度,避免人為操作差異。
維護光學部件:每月清潔比色皿槽與透鏡,每半年由工程師檢測光源強度與波長準確性。
采用多方法交叉驗證:對關鍵樣本,結合Bradford、BCA與紫外吸收法(A280)進行比對,提升結果可信度。
通過系統識別誤差源頭并實施全流程質量控制,蛋白質分析儀不僅能提供高重復性的數據,更能為下游實驗奠定可靠基礎。